2.2.4.3 Nuôi cấy tế bào đơn ................................................................ ................. 8
2.2.4.4 Nuôi cấy protoplast - chuyển gen ........................................... ................. 8
2.2.4.5 Nuôi cấy hạt phấn đơn bội ..................................................... ................. 8
2.2.5 Các giai đoạn nhân giống in vitro .................................................. ................. 8
2.2.5.1 Giai đoạn 1 ............................................................................. ................. 8
2.2.5.2 Giai đoạn 2 ............................................................................. ................. 9
2.2.5.3 Giai đoạn 3 ............................................................................. ................. 9
2.2.5.4 Giai đoạn 4 ............................................................................. ................. 9
2.2.5.5 Giai đoạn 5 ............................................................................. ............... 10
2.2.6 Các yếu tố ảnh hƣởng đến nhân giống in vitro .............................. ............... 10
2.2.6.1 Mẫu nuôi cấy .......................................................................... ............... 10
2.2.6.2 Điều kiện nuôi cấy .................................................................. ............... 11
2.2.6.3 Ảnh hƣởng của môi trƣờng nuôi cấy ...................................... ............... 12
2.2.7 Những vấn đề trong nhân giống in vitro ........................................ ............... 12
2.2.7.1 Tính bất định về mặt di truyền ............................................... ............... 12
2.2.7.2 Sự hoại mẫu ............................................................................ ............... 13
2.2.7.3 Việc sản xuất chất gây độc từ mẫu cấy .................................. ............... 13
2.2.7.4 Sử dụng thuốc kháng sinh ...................................................... ............... 14
2.2.7.5 Hiện tƣợng thủy tinh thể ......................................................... ............... 14
2.2.8 Chất điều hòa sinh trƣởng thực vật ................................................ ............... 14
2.2.8.1 Auxin ...................................................................................... ............... 15
2.2.8.2 Cytokynin ............................................................................... ............... 15
2.2.9 Những thành tựu về nuôi cấy mô cây rừng .................................. ............... 16
2.2.9.1 Trên thế giới ........................................................................... ............... 16
2.2.9.2 Tại Việt Nam .......................................................................... ............... 17
3. VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ..................................... ............... 19
3.1 Đối tƣợng thí nghiệm ............................................................................ ............... 19
3.2 Thời gian và địa điểm nghiên cứu ......................................................... ............... 19
3.3 Vật liệu nghiên cứu ............................................................................... ............... 19
3.3.1 Trang thiết bị và dụng cụ dùng trong nghiên cứu .......................... ............... 19
3.3.2 Môi trƣờng nuôi cấy ...................................................................... ............... 19
3.4 Điều kiện nuôi cấy in vitro .................................................................... ............... 21