DANH MỤC TÀI LIỆU
Luận văn: Đánh giá được ảnh hưởng của việc bổ sung hormone, bổ sung tế bào màng trong ống dẫn trứng và nguyên bào sợi thai chuột vào môi trường nuôi phôi lên kết quả thụ tinh ống nghiệm ở lợn
Đ I H C THÁI NGUYÊNẠ Ọ
TR NG Đ I H C KHOA H CƢỜ Ạ Ọ
–––––––––––––––––––
H A NGUY T MAIỨ Ệ
NGHIÊN C U NH H NG B SUNG T BÀO VÀỨ Ả ƢỞ
HORMONE LÊN S PHÁT TRI N C A PHÔI L N Ể Ủ
TH TINH NG NGHI MỤ Ố
Chuyên ngành: Công ngh sinh h cệ ọ
Mã s : 60 42 80
LU N VĂN TH C SĨ CÔNG NGH SINH H C Ệ Ọ
Ng i h ng d n khoa h c: TS. Bùi Xuân Nguyênƣờ ƣớ
Thái Nguyên, 2012
i
L I CAM ĐOAN
Tôi xin cam đoan đây công trình nghiên c u do chính tôi th c hi n. Các ự ệ
s li u, k t qu nghiên c u trong lu n văn này trung th c ch a ai côngố ệ ế ư
b trong b t c công trình nào khác. ấ ứ
Thái Nguyên, ngày 30 tháng 7 năm 2012
Tác gi
H a Nguy t Maiứ ệ
S hóa b i Trung tâm H c li u – Đ i h c Thái Nguyên ạ ọ
ii
L I C M N Ả Ơ
Tr c h t, tôi xin bày t lòng bi t n chân thành sâu s c nh t t i TS.ướ ế ế ơ
Bùi Xuân Nguyên - nguyên Tr ng phòng Công ngh phôi - Vi n công ngh sinhưở ệ ệ
h c đã đ nh h ng nghiên c u, t n tình h ng d n dìu d t tôi trong su t quá ướ ứ ậ ướ
trình th c hi n và hoàn thành lu n văn.ự ệ
Tôi xin bày t lòng c m n chân thành đ n t p th cán b phòng Công ả ơ ế
ngh phôi, Vi n Công ngh sinh h c, đ c bi t TS. Nguy n Th c đã nhi t ị Ướ
tình giúp đ , góp ý cho tôi trong quá trình th c hi n nh ng thí nghi m liên quan ự ệ
đ n lu n văn. Tôi xin chân thành c m n nh ng tình c m quý báu đó.ế ả ơ
Tôi cũng xin bày t lòng bi t n sâu s c t i các th y trong ban ch ế ơ
nhi m Khoa, các anh ch trong Khoa Khoa h c S s ng - tr ng Đ i h c Khoa ự ố ườ
h c đã luôn t o đi u ki n, quan tâm giúp đ tôi trong quá trình tôi h c t p, ọ ậ
nghiên c u.
Đ ng th i tôi cũng xin bày t lòng bi t n đ n nh ng ng i thân trong gia ế ơ ế ườ
đình, đ ng nghi p các b n c a tôi đã nh ng khích l tinh th n nh ng ạ ủ
quan tâm sâu s c trong su t th i gian tôi th c hi n lu n văn này. ố ờ
M t l n n a tôi xin chân thành c m n!ộ ầ ơ
Tác gi
H a Nguy t Maiứ ệ
S hóa b i Trung tâm H c li u – Đ i h c Thái Nguyên ạ ọ
iii
M C L CỤ Ụ
Tran
g
L I CAM ĐOAN.....................................................................................................i
L I C M N Ơ .........................................................................................................ii
M C L C .............................................................................................................iii
DANH M C CÁC CH VI T T T ....................................................................v
DANH M C CÁC B NG TRONG LU N VĂN ................................................vi
DANH M C CÁC HÌNH.....................................................................................vii
M Đ U ..................................................................................................................1
1. Đ t v n đặ ấ ...........................................................................................................1
2. M c tiêu c a đ tài ủ ề ..............................................................................................2
3. N i dung nghiên c u ............................................................................................2
CH NG 1: T NG QUAN TÀI LI UƢƠ ..............................................................3
1.1. S hình thành và phát tri n phôi ự ể in vivo ............................................................3
1.1.1. S th tinhự ụ ......................................................................................................3
1.1.2. Quá trình th tinh............................................................................................4
1.1.3. Nh ng y u t đ m b o x y ra s th tinh ế ố ả ....................................................5
1.1.4. S phát tri n c a phôi ể ủ in vivo .........................................................................6
1.1.5. S làm t c a phôi ổ ủ .........................................................................................8
1.2. Các y u t nh h ng lên s phát tri n c a phôi ế ố ả ư in vitro ................................9
1.2.1. Th tinh trong ng nghi m .............................................................................9
1.2.2. Bu ng tr ng ..................................................................................................10
1.2.3. Lo i nang tr ng ............................................................................................11
1.2.4. Quá trình nuôi thành th c tr ng và các hormone b sungụ ứ ............................12
1.2.5. H th ng nuôi phôiệ ố .......................................................................................13
1.3. Tình hình nghiên c u Vi t Namứ ở ...................................................................19
CH NG 2: Đ I T NG, V T LI U VÀ PH NG PHÁP NGHIÊN C U .. ƢƠ Ố ƢỢ ƢƠ
21
2.1. Đ i t ng nghiên c u ượ .....................................................................................21
2.2. Đ a đi m nghiên c u .......................................................................................21
2.3. V t li u nghiên c u .........................................................................................21
S hóa b i Trung tâm H c li u – Đ i h c Thái Nguyên ạ ọ
iv
2.3.1. D ng c , thi t b ế ị..........................................................................................21
2.3.2. Hóa ch t, môi tr ng ườ ...................................................................................22
2.4. Ph ng pháp nghiên c uươ .................................................................................23
2.4.1. Ph ng pháp thu, b o qu n và v n chuy n bu ng tr ngươ ...........................23
2.4.1.2. Ph ng pháp phân lo i ph m ch t tr ngươ .................................................23
2.4.2. Ph ng pháp thu t bào nguyên bào s i phôi chu t ươ ế ợ ộ (Mouse Embryonic
Fibroblast- MEF)..........................................................................................25
2.4.3. Ph ng pháp thu c m t bào màng trong ng d n tr ngươ ế ............................27
2.4.4. Ph ng pháp nuôi phôi và đánh giá s phát tri n c a phôiươ ể ủ .........................28
2.4.5. Ph ng pháp x lý s li uươ ...........................................................................30
CH NG 3: K T QU TH O LU NƢƠ .....................................................31
3.1. K t qu nhân nuôi t bào nguyên bào s i t bào thai chu tế ế ...........................31
3.2. Nghiên c u phân l p, nhân nuôi t bào màng trong ng d n tr ng ế ...............34
3.2.1. K t qu thu t bào màng trong ng d n tr ngế ế ............................................34
3.2.2. So sánh nh h ng th i gian quay c a c m t bào lên ch t l ng c a ưở ế ấ ượ
c m t bào thu đ c và c m t bào sau gi i đôngụ ế ượ ụ ế ......................................36
3.3. K t qu b sung hormone lên t l tr ng thành th cế .....................................37
3.4. K t qu nuôi phôi t các h th ng môi tr ngế ườ ..............................................39
3.4.1. H th ng 1 (HT1)ệ ố .........................................................................................39
3.4.2. H th ng 2 (HT2)ệ ố .........................................................................................40
3.4.3. H th ng 3 (HT3)ệ ố .........................................................................................41
3.4.4. H th ng 4 (HT4)ệ ố .........................................................................................43
3.5. So sánh k t qu t o phôi t các h th ngế ả ạ .......................................................44
3.5.1. So sánh t l t o phôi t h th ng 1, h th ng 2 và h th ng 3 ệ ố ệ ố ệ ố .................44
3.5.2. So sánh t l t o phôi t h th ng 2 và h th ng 4ỷ ệ ạ ....................................45
3.5.3. So sánh t l t o phôi t h th ng 1, 2, 3 và h th ng 4ỷ ệ ạ .............................46
K T LU N ............................................................................................................49
KI N NGHẾ Ị..........................................................................................................50
TÀI LI U THAM KH O ....................................................................................51
DANH M C CÁC CÔNG TRÌNH CÓ LIÊN QUAN Đ N LU N VĂN Ế Ậ ........58
S hóa b i Trung tâm H c li u – Đ i h c Thái Nguyên ạ ọ
v
DANH M C CÁC CH VI T T T Ữ Ế
T vi t t t ế ắ Nghĩa ti ng AnhếNghĩa ti ng Vi tế ệ
DMEM Dulbecco’s Modified Eagle Medium Môi tr ng DMườ
FPP Fertilization promoting peptide Peptide thúc đ y s th tinh ự ụ
FBS Fetal Bovine Serum Huy t thanh bòế
FSH Follicle stimulating hormone Hormon kích thích nang phát tri n
IVC In Vitro Culture Nuôi c y trong ng nghi m ố ệ
IVF In Vitro Fertilization Th tinh trong ng ngh m ố ệ
IVP In Vitro Production S n xu t trong ng nghi mả ấ
IVM In Vitro Maturation S thành th c trong ng nghi m ố ệ
LH Luteinsing Stimulating Hormone Hormon tăng tr ngưở
MAT Maturation Thành th c
NCSU - 23 North Carolina State University 23 Đ i h c phía B c bang Carolina 23ạ ọ
NCSU - 37 North california state university 37 Đ i h c phía B c bang Carolina 37ạ ọ
PBS Phosphate Buffer Saline Dung d ch đ mị ệ
POSP Porcine oviductal secretory protein ng d n tr ng l n ti t ra protêin ợ ế
PMSG Pregnant mare’s serum gonadotropin Huy t thanh ng a ch aế ự ử
TCM Tissue Culture Medium Môi tr ng nuôi c yườ ấ
ZP Zone Pellucide Màng trong su t
S hóa b i Trung tâm H c li u – Đ i h c Thái Nguyên ạ ọ
thông tin tài liệu
Ngày nay, công nghệ sinh học nói chung và công nghệ sinh học sinh sản nói riêng đã rất phát triển và đạt nhiều thành tựu quan trọng, đem lại nhiều ý nghĩa và lợi ích thiết thực trong cuộc sống. Một trong những thành tựu nổi bật nhất của công nghệ sinh học là sự kiện nhân bản vô tính thành công (1997) với sự ra đời của cừu Dolly. Còn trong sinh sản hữu tính thành tựu quan trọng nhất là tạo phôi trong ống nghiệm, phôi là nguồn vật liệu quan trọng trong chuyển cấy phôi tạo nguồn động vật đồng loạt, phục vụ cho các thử nghiệm trong y học, hoặc nhằm mục đích nâng cao năng suất vật nuôi trong chăn nuôi
Mở rộng để xem thêm
tài liệu giúp tôi
Nếu bạn không tìm thấy tài liệu mình cần có thể gửi yêu cầu ở đây để chúng tôi tìm giúp bạn!
xem nhiều trong tuần
yêu cầu tài liệu
Giúp bạn tìm tài liệu chưa có

LÝ THUYẾT TOÁN


×