NGHIÊN CỨU VACCINE PHÒNG BỆNH AUJESZKY
1
TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH
BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC
LỚP DH06SH
MÔN CHUẨN ĐOÁN BỆNH GIA SÚC GIA CẦM
Chuyên đề:
VACCINE PHÒNG BỆNH AUJESZKY
GV: Nguyễn Ngọc Hải
SV: Dương Ngọc Kiều Thi
MSSV: 06126144
2
Thủ Đức, ngày 01/10/2009
I.Đặt vấn đề.
Bệnh giả dại
Bệnh giả dại có nguy cơ lây nhiễm cao trên heo và các thú nuôi khác, như gia súc, cừu,
dê, do Herpesvirus suis gây ra ( còn gọi là “pseudorabies virus” hay “PRV”). Ở heo, bệnh gây
ra các tổn thương đường hô hấp và viêm não và có thể dẫn đến chết. Các triệu chứng khác phổ
biến trên heo như sẩy thai, chết heo sơ sinh, giảm lứa đẻ, và tăng tỉ lệ chậm phát triển. Các đàn
thú nuôi khác, hầu hết là các gia súc, nhiễm PRV hầu như luôn luôn dẫn đến chứng viêm não.
Bệnh giả dại đã trở thành nguồn đe dọa và là nguên nhân chính gây thiệt hại về kinh tế
cho ngành nuôi heo trên tòan thế giới. Sự lan rộng của bệnh giả dại trên gia súc và các thú nuôi
trong trang trại khác cũng đáng báo động. Trong 10 năm gần đây, thiệt hại về kinh tế càng leo
thang vì xuất hiện nhiều chủng virus PRV mới và ngày càng lan rộng. Ngày nay, ước lượng có
khoảng 8% của 80 triệu con heo của Mỹ bị nhiễm bệnh này, thấp hơn 0,8% so với cách đây một
thập kỷ.
Triệu chứng nhiễm bệnh và hậu quả nhiễm bệnh PRV có thể nhẹ hoặc ngăn chặn được
nhờ các loại vaccine bao gồm cả bị giết hay chủng sống biến đổi như các chủng nhược độc của
PRV. Tuy nhiên, hầu hết các chủng vaccine tồn tại đều khó kiểm soát sự lan rộng của bệnh giả
dại vì đặc tính sinh học duy nhất của PRV và các loại virus alpha herpes khác, như virus herpes
đơn type 1 và 2 ( còn gọi là “HSV-1” và “HSV-2” theo thứ tự), vericella-zoster, virus lây bệnh
rhinotracheitis trên trâu bò, virus herpes trên khỉ đuôi sóc, và herpesvirus type 1 trên ngựa.
Cụ thể hơn, virus herpes alpha có 1 khả năng đặc biệt đó là trạng thái im lìm trong các
mô thần kinh. Đó là, khi con thú bình phục từ lần nhiễm đầu tiên, herpes alpha rút lui đến 1 phần
của hệ thần kinh nơi chúng có thể trở nên im lặng và trơ với hàng rào miễn dịch của cơ thể.
Trạng thái bất hoạt này, như sự tiềm tàng, có thể phục hồi một cách bất ngờ làm tái phát bệnh
hay là 1 phương tiện truyền nhiễm bệnh, ở các thú bị nhiễm không có triệu chứng bên ngoài
nhưng có thể truyền hay nhiễm virus alpha một cách không liên tục, gây nên bệnh truyền nhiễm
và bộc phát thành dịch.
Sử dụng vaccine là biện pháp phòng bệnh đặc biệt hiệu quả đối với các bệnh do virus.
II. Tổng quan
1. Sơ lược về herpes alpha
Virus có đường kính khỏang 180nm, bộ gen của các chủng PRV dạng đường thẳng, xoắn
kép, các phân tử DNA hoán vị không có đạng vòng, kích thước bộ gen khỏang 146 kbp.
3
Bộ gen của các chủng PRV độc được xếp vào loại phân tử DNA lớp D. Giống như các
virus herpes khác, một vỏ capsid có 20 mặt được cấu thành từ 20 capsomers bao quanh bởi áo
lipoprotein. Lấy đi lớp áo của virus bằng một loại bột không ion hóa, như Triton X-100 hay
Nonidet P40, cho phép phân tách lớp áo ra nucleocapsid độc, chứa toàn bộ DNA và khỏang 1
nửa protein của virus. Nucleocapsid của virus gồm có 3 loại protein chính, khoảng 142000,
35000, 32000 daltons, 1 loại protein khác khoảng 62000 daltons, và 12 loại protein nhỏ hơn có
kích thước từ 10,000 tới 115,000 daltons. Lớp vỏ bọc chứa các protein còn lại của virus, bao
gồm ít nhất là 7 loại glycoprotein và 1 loại protein không glycosyl hóa. Cũng như những alpha
herpes virus khác, như HSV-1, những vỏ bọc protein, và tiền thân của chúng, có quy luật chung
là kích thích đáp ứng miễn dịch của tế bào hay dịch thể; đây là nhiệm vụ của chúng khi xâm
nhập vào các tế bào bị nhiễm; và chúng điều khiển sự dung hợp của vi khuẩn và virus.
Virus bị diệt ở 600C trong 50 phút, acid Phenic 5% trong 10-20 phút, Formol 0,5% trong
8 phút, NaOH 1% thì chết ngay. Trong xác thối rửa, virus sống được 11 ngày, trong thịt ướp
muối khỏang 20 ngày,…Dùng glycerin nguyên hoặc 50% có thể bảo tồn được nhiều năm trong
tủ lạnh.
Hình 1. Nguồn gốc của các chủng virus giả dại.
4
2. Các loại vaccine phòng ngừa bệnh giả dại:
2.1. Vaccine vô hoạt
Bất hoạt bằng quang động (purdue university 1982, india)
Virus PRV được chứng minh là nhạy cảm với ánh sáng. Do đó, dùng thuốc nhuộm
Methylene Blue (MB), ánh sáng và dòng điện kết hợp với nhau có thể bất hoạt được virus này.
Tính kháng nguyên của virus được bảo tồn, dùng kiểm tra tín hiệu miễn dịch hay điện di
miễn dịch để đo lượng kháng thể đặc hiệu.
Phương pháp này phù hợp với virus, rẻ tiền, dễ thực hiện, nhanh chóng.
Nồng độ MB thấp, chiếu sáng, dòng điện sẽ làm giảm sự có mặt của virus herpes simplex
và bức xạ với ánh sáng nhìn thấy được sẽ làm mất khả năng hình thành tế bào lớp mỏng.
• Vật liệu
- Một hộp chứa methyl methacrylate gắn điện cực platinum được dùng cho quá trình
bất hoạt quang động. Chỉ một lượng nhỏ ( khỏang 10 ml) virus bị bất hoạt mỗi lần. Kích
thước hộp ( dài, cao ,rộng) là 11,95, 2,98 , 2,98,. Làm bằng nhựa acrylic trong suốt, để
ánh sáng có thể xuyên qua, thể tích hộp khỏang 100ml.
Hình 2. Hộp nhựa và nguồn điện dùng để sản xuất vaccine.
- Nguồn sáng được cung cấp bởi đèn cao áp đặt trên hộp 20 cm.
5
- Nguồn điện xoay chiều 110V.
• Các bước thực hiện
- Thêm nhiều lượng thuốc nhuộm MB khác nhau vào 100ml mẫu chứa virus.
- Hỗn hợp thuốc nhuộm và virus được đặt trong hộp acrylic.
- Cung cấp dòng điện 12 µA, bước sóng ánh sáng biến đổi.
Người ta cũng thực hiện nhiều thí nghiệm như không cung cấp dòng điện, so sánh hiệu
quả bất hoạt của MB, ánh sáng và MB, ánh sáng, dòng điện được kết hợp với nhau, hay chỉ dùng
dòng điện kết hợp với ánh sáng mà không có MB.
Trong suốt quá trình bất hoạt, các mẫu virus được lấy ra trong các khỏang thời gian khác
nhau, thẩm tách bằng dung dịch đệm phosphate saline trong 48 tới 72 giờ (pH=7,2) để lấy đi hết
thuốc nhuộm MB.
Bảng 1. Kết quả của bất hoạt quang động PRV với nhiều nồng độ thuốc nhuộm khác
nhau và dòng điện khác nhau
Kết quả
Thí
nghiệm
MB
(M)
Dòng điện
(µA)
Thời gian
(Min)a
Lượng virus gốc
(TCID)50
Nồng độ
(TCID)50
% sống sót
1 10-5 12 8 4x107 8.0x102 0.010
12 0.010
16.5 0.001
2 10-5 0 8 4x107 1.0x104 0.125
12 1.3 x104 0.158
16.5 8.0 x102 0.010
3 2x10-5 12 8 1.1x106 1.4x103 0.131
12 1.2x103 0.112
16.5 <5.2x101b <0.005b
4 2x10-5 0 8 1.1x106 8.0x103 0.741
12 8.0x102 0.074
16.5 5.3x102 0.048
5 10-4 12 8 1.2x105 <5.2x101b <0.043b
12 0 0
6
16.5
0 0
6 10-4 0 8 1.2x105 7.2x102 0.600
12 8.0x102 0.667
16.5 1.1x103 0.869
7 0 12 8 1.3x106 4.7x105 35.778
12 1.4x105 10.498
16.5
6.3x105 48.523
8 10-4 12 8 1.3x106 8.0x101 0.006
12 5.2x101 0.004
16.5 <5.2x101b <0.004b
9 10-4 0 8 1.3x106 1.4x102 0.011
12 8.8x101 0.007
16.5
1.3x102 0.009
10 10-4 12 8 1.7x106 <5.2x101b <0.003b
12 0 0
16.5 0 0
akhoảng thời gian virus hay hỗn hợp virus phơi dưới dòng điện, hay ánh sáng, hay cả hai.
bhiệu quả gây bệnh cho tế bào thấp hơn 50% của giếng nguyên chất.
Phương pháp bất hoạt quang động này được phát triển bởi tính hiệu quả, đơn giản, và rẻ
tiền. Hiệu quả kháng nguyên của nó không bị ảnh hưởng bởi dòng điện cung cấp, nồng độ thuốc
nhuộm sử dụng.( nguồn : Agricutural Research Service U.S. )
Ngoài ra, người ta bất hoạt khả năng gây bệnh bằng tia UV hay xử lý với formaldehyde.
Quy trình cơ bản như sau: giống virus gốc, rã đông, nuôi cấy tăng sinh qua nhiều cấp, đo và kiểm
tra nồng độ, đến khi đạt yêu cầu, cho formadehyde vào, hòa đều, phối trộn với chất bổ trợ, đông
khô, phân chai, đóng gói. Sau khi cấp vào thú, sẽ kích thích thú sinh kháng thể chống lại các
glycoprotein của virus. Các thú có miễn dịch chống lại các vaccine này sau đó sẽ được bảo vệ
khỏi bệnh.
có thể bạn quan tâm
NGHIÊN CỨU VACCINE PHÒNG BỆNH VIÊM NÃO NHẬT BẢN
22
981
444
Khoa học tự nhiên
22
(New)
PROTEIN TÁI TỔ HỢP VÀ VIRUS AUJESZKY GÂY BỆNH HÔ HẤP Ở HEO
18
1.210
535
Khoa học tự nhiên
18
(New)
NGHIÊN CƯU VẮC – XIN PHÒNG BỆNH DẠI
19
832
400
Khoa học tự nhiên
19
(New)
NGHIÊN CỨU VẮC - XIN PHÒNG BỆNH PRRS
14
1.130
620
Khoa học tự nhiên
14
(New)
Nghiên cứu Vắc-xin Phòng Bệnh PMWS
14
1.348
511
Khoa học tự nhiên
14
(New)
NGHIÊN CỨU VẮC-XIN PHÒNG BỆNH THAN DO VI KHUẨN Bacillus anthracis
15
1.594
781
Khoa học tự nhiên
15
(New)
Phân tích đa dạng di truyền của các dòng nấm C. cassiicola trên cây ca...
82
708
377
Khoa học tự nhiên
82
(New)
Phân lập và xác định được một số đặc tính sinh học của vi khuẩn Strept...
83
932
363
Thạc sĩ cao học
83
(New)
thông tin tài liệu
Bệnh giả dại có nguy cơ lây nhiễm cao trên heo và các thú nuôi khác, như gia súc, cừu, dê, do Herpesvirus suis gây ra ( còn gọi là “pseudorabies virus” hay “PRV”). Ở heo, bệnh gây ra các tổn thương đường hô hấp và viêm não và có thể dẫn đến chết. Các triệu chứng khác phổ biến trên heo như sẩy thai, chết heo sơ sinh, giảm lứa đẻ, và tăng tỉ lệ chậm phát triển. Các đàn thú nuôi khác, hầu hết là các gia súc, nhiễm PRV hầu như luôn luôn dẫn đến chứng viêm não.
Mở rộng để xem thêm
tài liệu mới trong mục này
Tạo chủng Rhodococcus opacus B4 có biểu hiện của enzyme n- alkane monooxygenase tăng so với dòng chƣa biến nạp, bằng cách tạo plasmid chứa gene alkB1/alkB2 rồi chuyển plasmid đó vào R. opacus B4
Khảo sát tỉ lệ nhiễm Coliforms và E. coli trong nƣớc uống, nước giải khát có gas, nước uống có cồn đang lƣu hành trên địa bàn Thành phố Hồ Chí Minh.
Sản xuất được chế phẩm diệt ruồi hiệu quả mà không gây độc đối với con ngƣời và thân thiện với môi trường
Nghiên cứu mới để bảo vệ vi khuẩn probiotic và nâng cao giá trị của sữa chua về chỉ tiêu vi sinh vật.
Sản xuất kháng thể thỏ kháng ovalbumin và tinh chế kháng thể (IgG) kháng ovalbumin
tài liệu hot trong mục này
tài liệu giúp tôi
Nếu bạn không tìm thấy tài liệu mình cần có thể gửi yêu cầu ở đây để chúng tôi tìm giúp bạn!
xem nhiều trong tuần
Giáo trình Quản trị học của Đại học kinh tế quốc dân
Tâm lý xã hội VÀ Hệ tư tưởng
Mẫu slide chủ đề âm nhạc
4 đề thi học sinh giỏi Toán lớp 2, có đáp án kèm theo
Tham khảo 12 bài tập nguyên lý thống kê có lời giải
Các hiệu ứng HTML cho trang web
yêu cầu tài liệu
Giúp bạn tìm tài liệu chưa có
×
