DANH MỤC TÀI LIỆU
Phát hiện CMV (Cucumber Mosaic Virus), TMV (Tobacco Mosaic Virus) trong mẫu lá nghi ngờ bệnh virus bằng kỹ thuật DAS-ELISA (double antibody sanwich-enzyme linked immuno sorbent assay).
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP. HỒ CHÍ MINH
BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC
…. ….
KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP
NGHIÊN CỨU VIRUS (TMV, CMV) GÂY BỆNH TRÊN CÂY
ỚT TẠI HUYỆN CỦ CHI, TP. HỒ CHÍ MINH BẰNG KỸ
THUẬT ELISA XÂY DỰNG QUY TRÌNH PHÁT HIỆN
CMV BẰNG KỸ THUẬT RT-PCR
Ngành học: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Niên khóa: 2002 – 2006
Sinh viên thực hiện: HUỲNH VĨNH KHANG
Thành phố Hồ Chí Minh
Tháng 8/2006
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP. HỒ CHÍ MINH
BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC
…. ….
NGHIÊN CỨU VIRUS (TMV, CMV) GÂY BỆNH TRÊN CÂY
ỚT TẠI HUYỆN CỦ CHI, TP. HỒ CHÍ MINH BẰNG KỸ
THUẬT ELISA XÂY DỰNG QUY TRÌNH PHÁT HIỆN
CMV BẰNG KỸ THUẬT RT-PCR
Giáo viên hƣớng dẫn: Sinh viên thực hiện:
PGS.TS BÙI CÁCH TUYẾN HUỲNH VĨNH KHANG
Thành phố Hồ Chí Minh
Tháng 8/2006
iii
LỜI CẢM TẠ
Em cùng biết ơn Thầy Bùi Cách Tuyến đã tận tình hƣớng dẫn truyền đạt cho
em những kinh nghiệm quý báu trong suốt thời gian làm đề tài.
Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến:
Quý thầy cô trƣờng Đại học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh đã tận tâm giảng dạy,
truyền đạt cho em nền tảng kiến thức vững chắc sau bốn năm đại học.
Ban giám đốc Trung Tâm Phân Tích Hóa Sinh - Trƣờng Đại Học Nông m
TP. Hồ Chí Minh cùng toàn thể các anh chị tại Trung Tâm đã tạo điều kiện thuận lợi
tối đa cũng nhƣ tận tình giúp đỡ em trong thời gian thực tập tốt nghiệp.
Thầy Bùi Minh Trí, Thầy Huỳnh Văn Biết, Thầy Trần Nhật Phƣơng đã tận tình
giúp đỡ, dạy bảo và trang bị cho em những kiến thức bổ ích.
Cảm ơn các bạn lớp Công Nghệ Sinh Học 28 đã luôn đồng hành, chia sẻ vui
buồn, động viên và giúp đỡ tôi trong suốt thời gian học tập và làm đề tài.
Thành phố Hồ Chí Minh, tháng 8 năm 2006
Huỳnh Vĩnh Khang
iv
TÓM TẮT KHÓA LUẬN
HUNH NH KHANG, Đại học ng m TP. HC Minh. Tháng 8/2006.
“Nghiên cứu một số virus (TMV, CMV) gây bệnh trên cây t tại huyện Củ Chi, TP.
Hồ Chí Minh bằng kỹ thuật ELISA xây dựng quy trình phát hiện CMV bằng kỹ
thuật RT-PCR” đƣợc thc hiện ttháng 03 đến tháng 08/2006 tại Trung tâm Pn tích
a Sinh-Trƣờng Đại Học Nông m Tp. Hồ Chí Minh.
Đề tài thực hiện các nội dung sau:
1. Thu mẫu theo triệu chứng bệnh virus, 5-15 mẫu/ruộng.
2. Xác định tỷ lệ nhiễm các loại virus CMV, TMV tại 4 Hòa Phú, Nhuận Đức,
An Nhơn Tây và Trung Lập Thƣợng, huyện Củ Chi bằng kỹ thuật ELISA.
3. Bƣớc đầu xây dựng quy trình chẩn đoán CMV bằng k thuật RT-PCR.
Kết quả đạt đƣợc:
1. Xác định đƣợc tỷ lệ nhiễm các loại virus CMV, TMV tại các xã nhƣ sau:
- Hòa Phú: CMV: 86,7%; TMV: 76,7%.
- Nhuận Đức: CMV: 93,8%; TMV: 60,0%.
- An Nhơn Tây: CMV: 83,3%; TMV: 66,7%.
- Trung Lập Thƣợng: CMV: 81,3%; TMV: 87,5%.
2. Xây dựng đƣợc quy trình RT-PCR để chẩn đoán CMV.
v
ABSTRACT
Huynh Vinh Khang, studying at Nong Lam University has finished the thesis for
6 months (3-8/2006). The thesis entitled: “Research on viruses (TMV, CMV) causing
diseases on pepper at Cu Chi District, Ho Chi Minh City using ELISA technique.
Formulating RT-PCR protocol to detect CMV”. This research was carried out in the
laboratory of biotechnology and chemistry of Nong Lam University.
The objectives of this research are as follows:
1. Collecting the samples with the virus symptoms, 5-15 samples per field.
2. Determining infected levels of TMV and CMV at Hoa Phu, Nhuan Duc, An
Nhon Tay and Trung Lap Thuong Communes, Cu Chi District. Double antibody
sandwich-enzyme linked immunosorbent assay (DAS-ELISA) method was
standardized for the detection of TMV and CMV infection in pepper plants.
3. Formulating the RT-PCR protocol to detect CMV. CP gene of the virus was
amplified.
The results of this research are as follows:
1. Infected levels of TMV and CMV were defined:
- Hoa Phu: CMV: 86.7%; TMV: 76.7%.
- Nhuan Duc: CMV: 93.8%; TMV: 60.0%.
- An Nhon Tay: CMV: 83.3%; TMV: 66.7%.
- Trung Lap Thuong: CMV: 81.3%; TMV: 87.5%.
2. The RT-PCR protocol detects CMV successfully.
vi
DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT
- cDNA: Complementary Deoxyribonucleotide Acid.
- CMV: Cucumber Mosaic Virus.
- CP: capsid protein.
- DAS-ELISA: Double Antibody Sandwich Enzyme Linked Immuno Sorbent
Assay.
- DEPC: Diethyl pyrocarbonate
-dNTP: Deoxyribonucleoside triphosphate.
- M-MLV: Moloney murine leukemia virus.
- MP: movement protein.
- OD: Optical Density.
- ORF: Open Reading Frame.
- PBS-Tween: Phosphate buffered saline with tween 20.
- p-NPP: p-nitrophenol phosphate.
- PVP: Polyvinylpyrrolidone.
- RNA: Ribonucleic acid.
- RNAbc: RNA binding column.
- RT-PCR: Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction.
- TMV: Tobacco Mosaic Virus.
thông tin tài liệu
Cây ớt (Capsicum annum L.) là cây trồng quan trọng thứ hai (sau cây cà chua) trong các loại cây vừa là một loại rau vừa là một loại gia vị. Gần đây ớt trở thành một mặt hàng có giá trị kinh tế vì ớt không chỉ đƣợc dùng làm gia vị trong công nghiệp chế biến thực phẩm mà còn là dược liệu để bào chế các thuốc trị ngoại khoa nhƣ phong thấp, nhức mỏi, cảm lạnh hay nội khoa như thương hàn, cảm phổi, thiên thời…nhờ chất capsaicine chứa trong trái. Nhờ vậy nhu cầu và diện tích ớt ở nhiều nƣớc có chiều hướng gia tăng.
Mở rộng để xem thêm
xem nhiều trong tuần
yêu cầu tài liệu
Giúp bạn tìm tài liệu chưa có

LÝ THUYẾT TOÁN


×