DANH MỤC TÀI LIỆU
Tạo chủng Rhodococcus opacus B4 có biểu hiện của enzyme n- alkane monooxygenase tăng so với dòng chưa biến nạp, bằng cách tạo plasmid chứa gene alkB1/alkB2 rồi chuyển plasmid đó vào R. opacus B4
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP. HỒ CHÍ MINH
BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC
************
NGUYỄN TRẦN MINH ANH
TĂNG BIỂU HIỆN GENE ALKB1, ALKB2 MÃ HÓA
ENZYME N- ALKANE MONOOXYGENASE
Rhodococcus opacus B4
LUẬN VĂN KỸ
CHUYÊN NGÀNH: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Thành phố Hồ Chí Minh
Tháng 9/2006
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP. HỒ CHÍ MINH
BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC
************
TĂNG BIỂU HIỆN GENE ALKB1, ALKB2 MÃ HÓA
ENZYME N- ALKANE MONOOXYGENASE
Rhodococcus opacus B4
LUẬN VĂN KỸ
CHUYÊN NGÀNH: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Giáo viên hƣớng dẫn: Sinh viên thực hiện:
GS. TS. HISAO OHTAKE NGUYỄN TRẦN MINH ANH
TS. LÊ ĐÌNH ĐÔN
Thành phố Hồ Chí Minh
Tháng 9/2006
MINISTRY OF EDUCATION AND TRAINING
NONG LAM UNIVERSITY, HCMC
FACULTY OF BIOTECHNOLOGY

OVEREXPRESS GENE ALKB1/B2 ENCODING
FOR N-ALKANE MONOOXYGENASE IN
Rhodococcus opacus B4
GRADUATION THESIS
MAJOR: BIOTECHNOLOGY
Professor Student
Pro.Dr. HISAO OHTAKE NGUYEN TRAN MINH ANH
Dr. LE DINH DON TERM: 2002 - 2006
HCMC, 09/2006
iii
LỜI CẢM ƠN
Tôi xin chân thành cảm ơn:
Ban Giám Hiệu trƣờng Đại Học Nông Lâm Tp. Hồ Chí Minh đã tạo mọi
điều kiện cho tôi trong suốt thời gian học tập tại trƣờng.
Các Thầy trong Bộ Môn Công Nghệ Sinh Học cùng các thầy khác
trong trƣờng đã luôn tận tình hƣớng dẫn, giảng dạy và giúp đỡ tôi.
TS. Đình Đôn GS. TS. Hisao Ohtake, TS. Honda, TS. Sameshima,
TS. Yamashita đã trực tiếp ớng dẫn giúp đỡ tôi trong suốt thời gian
thực hiện đề tài tốt nghiệp.
Tập thể phòng thí nghiệm sinh hóa, khoa công nghê ̣
sinh ho ̣
c, đa ̣
i ho ̣
c Osaka
đã tạo mọi điều kiện giúp em hoàn thành đề tài.
Trƣờng Đại Học Osaka, Nhật Bản đã giúp đỡ tôi trong thời gian vừa qua.
Tập thể các bạn sinh viên trong lớp CNSH 28 đã hỗ trợ, giúp đỡ động
viên tôi trong suốt thời gian làm đề tài.
Con thành kính ghi ơn cha mẹ và tất cả những ngƣời thân trong gia đình luôn
nguồn động viên và khích lệ to lớn cho con trong suốt thời gian học tập tại trƣờng.
Tháng 06 năm 2006
Nguyễn Trần Minh Anh
iv
TÓM TẮT KHÓA LUẬN
NGUYỄN TRẦN MINH ANH, Đại học Nông Lâm TP.HCM. Tháng 9/2006.
“CHUYỂN PLASMID CHỨA GENE ALKB1, ALKB2 VÀO Rhodococcus opacus B4
ĐỂ TĂNG NĂNG SUẤT TẠO ENZYME N- ALKANE MONOOXYGENASE
PHÂN GIẢI N- ALKANE TẠO N-ALCOHOL”.
Giáo viên hƣớng dẫn:
GS. TS. HISAO OHTAKE
TS. LÊ ĐÌNH ĐÔN
Khóa luận nhằm tạo chủng Rhodococcus opacus B4 biểu hiện của enzyme
n- alkane monooxygenase tăng so với dòng chƣa biến nạp, bằng cách tạo plasmid chứa
gene alkB1/alkB2 rồi chuyển plasmid đó vào R. opacus B4.
Một số kết quả đạt đƣợc:
- Tạo đƣợc plasmid mới có promoter mạnh và có chứa gene alkB1/ alkB2.
- Tạo đƣợc ng R. opacus B4 mới biểu hiện gene alkB1/ alkB2 tăng so với
ng tự nhiên.
- Đề xuất: kiểu bể phản ứng dành cho R. opacus.
v
MỤC LỤC
TRANG
Trang tựa
Lời cảm ơn ..................................................................................................................... iii
Tóm tắt khóa luận ........................................................................................................... iv
Mục lục ............................................................................................................................ v
Danh sách các hình ........................................................................................................ vii
Danh sách sơ đồ và bảng ............................................................................................. viii
1. MỞ ĐẦU ................................................................................................................... 1
1.1. Đặt vấn đề .............................................................................................................. 1
1.2. Mục đích và yêu cầu .............................................................................................. 1
1.2.1. Mục đích .......................................................................................................... 1
1.2.2. Yêu cầu ............................................................................................................ 1
2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU .......................................................................................... 2
2.1. Tầm quan trọng của sản xuất hóa chất bằng sinh vật ............................................ 2
2.2. Giới thiệu chung về loài vi khuẩn Rhodococcus ................................................... 3
2.3. Giới thiệu về Rhodococcus opacus B4 .................................................................. 5
2.4. N- alkane monooxygenase .................................................................................... 8
3. VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ................................................. 11
3.1. Thời gian và địa điểm .......................................................................................... 11
3.2. Vật liệu ................................................................................................................ 11
3.2.1. Chủng vi khuẩn và phƣơng pháp nuôi cấy .................................................... 11
3.2.2. Plasmid .......................................................................................................... 11
3.2.3. PCR primers .................................................................................................. 11
3.2.4. Môi trƣờng ..................................................................................................... 12
3.3. Chiến lƣợc thí nghiệm tổng quát ......................................................................... 14
3.4. Phƣơng pháp ........................................................................................................ 15
3.4.1. Kỹ thuật ......................................................................................................... 15
3.4.1.1. PCR ............................................................................................................ 15
3.4.1.2. Thiết kế mồi ............................................................................................... 15
thông tin tài liệu
Ngày nay, các công nghệ sản xuất các hóa chất có giá trị thƣơng mại từ các chất không tan trong nƣớc nhƣ các hydrocarbon từ nguồn dầu mỏ bằng xúc tác sinh học đang rất đƣợc quan tâm. Các tế bào thƣờng đƣợc sử dụng làm xúc tác sinh học vì có sẵn các cofactor (NADH,…) và có khả năng tái tạo các cofactor này. Khả năng tái tạo các cofactor của tế bào rất cần thiết cho các phản ứng oxy hóa và khử. Trong ngành công nghệ hóa chất, nguyên liệu để tổng hợp hóa chất thƣờng không phân cực nhƣ các hydrocarbon trong dầu mỏ và các dẫn xuất của chúng. Các nguyên liệu này và các sản phẩm tạo thành có độc tính cao đối với các xúc tác sinh học và làm giới hạn việc ứng dụng xúc tác sinh học trong ngành công nghiệp hóa chất. Giải pháp cho vấn đề này là phải sử dụng các vi sinh vật chủ (host strain) có khả năng chịu đƣợc các dung môi hữu cơ làm xúc tác sinh học.
Mở rộng để xem thêm
xem nhiều trong tuần
yêu cầu tài liệu
Giúp bạn tìm tài liệu chưa có

LÝ THUYẾT TOÁN


×