Home
Luận văn - báo cáo
Khoa học tự nhiên
Thiết lập quy trình tiếp hợp plasmid pUT-gfp trong vi khuẩn E.coli DH5α (λ-pir) vào vi khuẩn Pseudomonas fluorescens bằng phương pháp tiếp hợp ba thành phần
Thiết lập quy trình tiếp hợp plasmid pUT-gfp trong vi khuẩn E.coli DH5α (λ-pir) vào vi khuẩn Pseudomonas fluorescens bằng phương pháp tiếp hợp ba thành phần
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP. HỒ CHÍ MINH
BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC
***000***
ĐỖ TH NGỌC HÂN
CHUYỂN GEN gfp (GREEN FLUORESCENT PROTEIN)
VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN Pseudomonas fluorescens
BẰNG PHƢƠNG PHÁP TIẾP HỢP BA THÀNH PHẦN
Luận văn kỹ sƣ
Chuyên ngành: Công nghệ sinh học
Thành phố Hồ Chí Minh
Thng 09 / 2006
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP. HỒ CHÍ MINH
BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC
***000***
CHUYỂN GEN gfp (GREEN FLUORESCENT PROTEIN)
VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN Pseudomonas fluorescens
BẰNG PHƢƠNG PHÁP TIẾP HỢP BA THÀNH PHẦN
Luận văn kỹ sƣ
Chuyên ngành: Công nghệ sinh học
Giáo viên hƣớng dẫn: Sinh viên thực hiện:
LÊ ĐÌNH ĐÔN ĐỖ TH NGỌC HÂN
Kha: 2002 - 2006
Thành phố Hồ Chí Minh
Thng 09 / 2006
MINISTRY OF EDUCATION AND TRAINING
NONG LAM UNIVERSITY, HCMC
DEPARTMENT OF BIOTECHNOLOGY
************
TRANSFER gfp (GREEN FLUORESCENT PROEIN) GENE
INTO Pseudomonas fluorescens BACTERIAL CELL
BY TRIPARENTAL MATING MENTHOD
Graduation thesis
Major: Biotechnology
Professor Student
LE DINH DON DO THI NGOC HAN
Term: 2002 - 2006
Ho Chi Minh City
09 / 2006
iv
iv
LỜI CẢM ƠN
Tôi xin chân thành cm ơn:
Gia đình là chỗ dựa về vật chất và tinh thần cho tôi trong suốt thời gian học tập và làm
khóa luận.
Ban gim hiệu Trƣờng Đại Học Nông Lâm Thành Phố Hồ Chí Minh.
Ban chủ nhiệm cùng thầy cô Bộ Môn Công Nghệ Sinh Học đã truyền đạt mọi kiến
thức, giúp đỡ và tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong thời gian học tập ở trƣờng.
Thầy Lê Đình Đôn đã tận tình hƣớng dẫn tôi trong suốt qu trình thực tập và hoàn
tất khóa luận tốt nghiệp này.
Thầy Zhang Liqun ở Đại Học Nông Nghiệp Trung Quốc đã cung cấp mẫu vi khuẩn E.coli
DH5α (λ-pir) chứa plasmid pUT-gfp, vi khuẩn E.coli DH5α (λ-pir) chứa plasmid pRK600 và
cc tài liệu phục vụ cho thí nghiệm.
Ban gim đốc cùng cc anh chị trực thuộc Trung Tâm Phân Tích – Thí Nghiệm
Hóa Sinh Trƣờng Đại Học Nông Lâm Thành Phố Hồ Chí Minh đã hƣớng dẫn và chia
sẻ cùng tôi những khó khăn trong thời gian thực hiện khóa luận.
Anh Nguyễn Văn Lẫm đã nhiệt tình giúp đỡ tôi hoàn thành luận văn này.
Tất cả cc anh chị thuộc Bộ Môn Bảo Vệ Thực Vật Khoa Nông Học đã giúp đỡ tôi
trong qu trình thực hiện đề tài.
Cc bạn bè lớp Công Nghệ Sinh Học 28 đã giúp đỡ và động viên tôi trong suốt
những năm học cũng nhƣ thời gian thực hiện khóa luận.
Thành phố Hồ Chí Minh, thng 8 năm 2006
Sinh viên
Đỗ Thị Ngọc Hân
v
v
TÓM TẮT
Đỗ Thị Ngọc Hân, Đại học Nông Lâm Thành phố Hồ Chí Minh, “CHUYỂN GEN
gfp (GREEN FLUORESCENT PROTEIN) VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN
Pseudomonas fluorescens” BẰNG PHƢƠNG PHÁP TIẾP HỢP BA THÀNH
PHẦN. Đề tài đƣợc thực hiên ở Trƣờng Đại học Nông Lâm Tp. Hồ Chí Minh, thời
gian từ thng 02/2006 đến thng 08/2006, dƣới sự hƣớng dẫn cuả Thầy Lê Đình Đôn.
Nội dung nghiên cứu
Chọn lọc vi khuẩn Pseudomonas fluorescens trên môi trƣờng chọn lọc.
Xây dựng quy trình tiếp hợp plasmid pUT- gfp vào vi khuẩn Pseudomonas
fluorescens bằng phƣơng php tiếp hợp ba thành phần (triparental mating).
Tch chiết DNA plasmid pUT-gfp để làm mẫu dò.
Tiến hành phƣơng php Dot Blot để kiểm tra gen đã chuyển.
Xem biểu hiện gen pht sng trên kính hiển vi có pht huỳnh quang.
Kết quả đạt đƣợc
Thiết lập đƣợc quy trình tiếp hợp Plasmid pUT- gfp vào vi khuẩn Pseudomonas
fluorescens bằng phƣơng php tiếp hợp ba thành phần (triparental mating).
Hoàn thiện quy trình kiểm tra gen đã chuyển bằng phƣơng php Dot Blot và xem
lại trên kính hiển vi pht huỳnh quang.
vi
vi
MỤC LỤC
Nội dung Trang
LỜI CẢM ƠN ....................................................................................................................... iii
TÓM TẮT ............................................................................................................................ iv
MỤC LỤC ............................................................................................................................. v
DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT ................................................................................. ix
DANH SÁCH CÁC HÌNH .................................................................................................... x
DANH SÁCH BẢNG ........................................................................................................... xi
Phần 1. MỞ ĐẦU .................................................................................................................. 1
1.1 Đặt vấn đề ............................................................................................................ 1
1.2 Mục tiêu đề tài ..................................................................................................... 1
1.3 Đối tƣợng nghiên cứu ......................................................................................... 1
1.4 Nội dung thực hiện .............................................................................................. 2
Phần 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU ......................................................................................... 3
2.1 Sự di chuyển gen và ti tổ hợp gen ở vi khuẩn ......................................... 3
2.1.1 Hiện tƣợng biến nạp (Transfomation) ............................................. 3
2.1.1.1 Định nghĩa ............................................................................. 3
2.1.1.2 Cơ chế hiện tƣợng biến nạp ................................................... 3
2.1.2 Hiện tƣợng tải nạp (Transduction) .................................................... 4
2.1.2.1 Định nghĩa ............................................................................. 4
2.1.2.2 Cơ chế hiện tƣợng tải nạp ...................................................... 4
2.1.3 Hiện tƣợng tiếp hợp ở vi khuẩn (Conjugation) ................................. 5
2.1.3.1 Định nghĩa ............................................................................. 5
2.1.3.2 Thí nghiệm Lederberg và Tatum (1946) ............................... 5
2.1.3.3 Yếu tố giới tính F ................................................................... 7
2.1.3.4 Cc loại vi khuẩn đực mang yếu tố F .................................... 8
2.1.3.5 Cơ chế qu trình tiếp hợp .................................................... 11
2.1.3.6 Lập bản đồ bằng tiếp hợp .................................................... 11
2.2 Vch tế bào của vi khuẩn ........................................................................ 12
2.2.1 Cấu tạo vch tế bào Gram (+) ......................................................... 13
có thể bạn quan tâm
Khảo sát khả năng sinh axít lactic của vi khuẩn Lactobacillus acidophi...
60
875
296
Khoa học tự nhiên
60
(New)
Vi khuẩn Lactic và việc ngân cao chất lượng của sữa chua thông qua phư...
85
838
290
Khoa học tự nhiên
85
(New)
Phân lập được chủng vi khuẩn Bacillus subtilis từ đất có khả năng đối...
73
799
360
Khoa học tự nhiên
73
(New)
Phân tích hiệu ứng của phá giá nội tệ lên cán cân thanh toán -Phương p...
20
1.052
376
Kinh tế quản lý
20
(New)
Tìm hiểu những ứng dụng của họ vi điều khiển PIC 16F877A, ngôn ngữ lập...
34
875
401
Kỹ thuật
34
(New)
sát khuẩn, trị giun sán bằng hạt bí ngô
2
935
349
Sống khỏe
2
(New)
Tính giá thành theo phương pháp trực tiếp (tính giá thành giản đơn).
3
795
291
Kế toán, kiểm toán
3
(New)
Thiết lập qui trình tinh sạch enzyme bromelain từ thân dứa bằng phương...
93
931
1.310
Khoa học tự nhiên
93
(New)
thông tin tài liệu
Hiện nay, các tác nhân gây bệnh đang trải rộng trên nhiều loại cây trồng, trong khi đó các biện pháp phòng trừ hóa học ngày càng gây ô nhiễm môi trường. Do đó việc sử dụng biện pháp sinh học nhằm bảo vệ thực vật là yêu cầu ngày càng cấp thiết.
Trong bản thân đất và trên cây trồng, vi khuẩn, virus, nấm chúng đã tồn tại sẵn và có tính đối kháng, có khả năng ức chế lẫn nhau. Tuy nhiên, thường do điều kiện sống, cac tac nhân gây bệnh phát triển mạnh mẽ, số lượng cá thể tăng nhanh, khả năng chống chịu tốt, lấn lướt cac tac nhân đối kháng làm cho tính đối kháng mất cân bằng và kết quả là bệnh bộc phát trên cây trồng. Để khắc phục điều này, việc chọn lọc, nhân nhanh số lƣợng, tăng cƣờng sức sống cho các tác nhân đối kháng và đưa vào lại môi trƣờng tự nhiên là hết sức cần thiết. Vì vậy, việc xây dựng một hệ thống nhằm kiểm soát sự định cư của vi khuẩn là cần thiết.
Mở rộng để xem thêm
tài liệu mới trong mục này
Tạo chủng Rhodococcus opacus B4 có biểu hiện của enzyme n- alkane monooxygenase tăng so với dòng chƣa biến nạp, bằng cách tạo plasmid chứa gene alkB1/alkB2 rồi chuyển plasmid đó vào R. opacus B4
Khảo sát tỉ lệ nhiễm Coliforms và E. coli trong nƣớc uống, nước giải khát có gas, nước uống có cồn đang lƣu hành trên địa bàn Thành phố Hồ Chí Minh.
Sản xuất được chế phẩm diệt ruồi hiệu quả mà không gây độc đối với con ngƣời và thân thiện với môi trường
Nghiên cứu mới để bảo vệ vi khuẩn probiotic và nâng cao giá trị của sữa chua về chỉ tiêu vi sinh vật.
Sản xuất kháng thể thỏ kháng ovalbumin và tinh chế kháng thể (IgG) kháng ovalbumin
tài liệu hot trong mục này
tài liệu giúp tôi
Nếu bạn không tìm thấy tài liệu mình cần có thể gửi yêu cầu ở đây để chúng tôi tìm giúp bạn!
xem nhiều trong tuần
Giáo trình Quản trị học của Đại học kinh tế quốc dân
Tâm lý xã hội VÀ Hệ tư tưởng
Mẫu slide chủ đề âm nhạc
4 đề thi học sinh giỏi Toán lớp 2, có đáp án kèm theo
Tham khảo 12 bài tập nguyên lý thống kê có lời giải
Các hiệu ứng HTML cho trang web
yêu cầu tài liệu
Giúp bạn tìm tài liệu chưa có
×
